Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩张

从第一次不止现口内自身突变到不止现1标准型肝炎针灸病征的困难重重率在孩童初期就有很好的叙述，多个口内自身突变HIV的孩童中都有70%在血清转换后10年内患上肝炎，而随访15年的孩童这一比重减低到84%。来得，占针灸1标准型肝炎一半以上的标准型1标准型肝炎的胃癌机制还并未受益充分的研究成果。

日益多的人开始可用分期依靠系统来定义1标准型肝炎的困难重重：幼基底在不止现多种口内自身突变时离开第1过渡阶段，不止现低血糖持续性时离开第2过渡阶段，不止现病征时离开第3过渡阶段。一些多发口内自身突变HIV的幼基底，在1期和2期，困难重重较快，并转变为胃癌的1标准型肝炎。我们以后叙述了一四组在首次扫描到多种口内自身突变样本后至寡10年无肝炎的近乎快困难重重者，这四组病征000人寡，但外观上非常明确。随后，我们发现口内自身抗基底特异性CD8+T巨噬细胞反应在困难重重近乎快的病征中都基本不存在，但在近期胃癌和由来已久的肝炎病征中都很容易扫描到。这可能表明，与困难重重病征来得，这些病征自身免疫反应的调控增强。

一初期研究成果表明，尽管调控性T巨噬细胞(Treg)存量正常，但肝炎病征存在一些动态缺陷，其中都包括对IL-2的反应战斗能力降低。此外，肝炎病征中都的畸变CD4+T巨噬细胞可能对调控日益具抵抗性，表现为畸变T巨噬细胞的抑止增强，自然显现出的Treg和胃显现出的正向Treg，以及抗基底境遇的CD4+T巨噬细胞中都IL-2反应增强。本研究成果的意在是叙述了CD4+调控性T巨噬细胞(Treg)在一小群近乎近乎快困难重重者中都的外观上，他们的平均年纪为43岁(31-72岁)，随访间隔时间为18-32年。

方法：BOX研究成果是一项以老年人为了将的纵向研究成果，在21岁请注意胃癌的病征亲属中都检查1标准型肝炎的小心心理因素。我们以后叙述了长期近乎快困难重重者的外观上，他们持续保持多重口内自身突变HIV大约10年，但并未不止现肝炎的针灸病征，快性或非完成性自身免疫。随后，10名继续持续保持无肝炎并愿意提供大量血液样本的近乎快困难重重者扩展到T和B巨噬细胞动态研究。在迄今的研究成果中都，8名快困难重重者(SP四组)，中都位年纪43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的口内自身突变HIV。所有的参与者都处于1标准型肝炎困难重重的1期，尽管一些人随后失去了口内自身突变对某些抗基底的HIV反应，然而，一名病征仍未处于2期至寡6年，但并未不止现针灸病征，一名病征被检验为肝炎，该受试者72岁，在采集实验样本时，其HbA1c急剧下降到53 mmol/mol(7%)，在数据研究中都对该小分子完成了直接审核。分离外周血单个核巨噬细胞(PBMCs)，可用多参数流式巨噬细胞忍术和T巨噬细胞抑止实验审核小分子中都Treg的振幅、表标准型和动态。可用FlowSOM和CITRUS(聚类有系统研究、相关联和紧接)完成无监督聚类研究，审核Treg表标准型。

结果：与健康小分子来得，来自快困难重重基底的心灵CD4+T巨噬细胞的监督聚类推断，激活的心灵CD4+ Treg振幅减低，与低剂量正向的TNFR相关蛋白(GITR)强调减低有关。一名HbA1c急剧下降的病征与困难重重近乎快者和也就是说的准确率来得，Treg谱有所完全相同。动态研究表明，与健康小分子来得，来自近乎快困难重重基底的Treg介导的CD4+畸变T巨噬细胞抑止明显受到破坏。表现为对畸变CD4+T巨噬细胞CD25和CD134强调的抑止减低。

由此可知1 有系统的表标准型研究推断，CD4+Treg亚标准型在快困难重重队列中都减低。由FlowSOM生成的Treg室，聚集在来自所有小分子的活CD4+CD45RA -巨噬细胞上。根据标明物强调有系统研究不止10个元簇:心灵T巨噬细胞_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +心灵T巨噬细胞;CPUTreg_1;CPUTreg_2;CPUTreg_3;和CPUTreg_4。(a)可用9个完全相同Treg标明生成的10个元簇的MST。每个路由表代表一个集群(100个集群)，日益大的元集群(10个元集群)在路由表四组周围制做。每个路由表中都的年糕由此可知暗示单个标明的强调行政级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以推断适度标明强调。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)生成由此可知，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相比重元素为每个metacluster箱子本站由此可知(重元素> 0.05%)确定为HD和SP四组:CPUTreg_2 (e),CPUTreg_3 (f),CPUTreg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T巨噬细胞(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T巨噬细胞(l)。绿色红色代表慈善机构SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon相加符号秩化验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 可用CITRUS的预测模标准型证实，Treg振幅的减低是困难重重近乎快的徽标。AO奈斯(a - f)和柑橘研究(g-k)比较SP参与者和也就是说的HD参与者在CD4+CD45RA−T巨噬细胞上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l族群的代表性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3可溶性，然后通过HLA-DR和GITR强调完成分离，实时FlowSOM族群。(b) HD(黑点)和SP(斑点)四组以及小分子SP 606(绿色)中都CD25+ cd127的振幅简介由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+奈斯子集的箱子本站由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(CPUTreg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(CPUTreg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(CPUTreg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+CPUT cell)。(g - i)柑桔簇旋转由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3强调准确度着色，箭头突不止的簇被识别为SP和HD队列之间的完全相同。(j)箱子本站由此可知推断了在SP(斑点)和HD(灰点)四组中都，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的相比重元素(比重)。(k)直方由此可知推断每个簇的表标准型(粉红色)和Treg标明相比强调与背景强调(蓝色);上列，CPUTreg_3;下面一行，CPUTreg_4。背景与所有其他簇中都标明的强调有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon相加符号秩化验

由此可知3 与健康献血者来得，困难重重近乎快者心灵treg的GITR减低。每个心灵CD4+T巨噬细胞元簇(心灵T巨噬细胞_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T巨噬细胞;HLA-DR + GITR +心灵T巨噬细胞;CPUTreg_2;CPUTreg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)扫描每个强调标明的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的强调热由此可知(sp606不包括在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇中都所有HD(白色)、所有SP(蓝色)和SP 606(绿色)的FlowSOM GITR强调串接，推断直方由此可知(c)和简介由此可知(d)。Wilcoxon相加符号秩和化验，p< 0.07(绿色)所有小分子包括，p< 0.05(蓝色)小分子SP 606和也就是说的HD不包括在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR强调，从AO奈斯，从所有HD(白色)、所有SP(蓝色)和SP 606(绿色)串接，推断直方由此可知(e)和简介由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon相加符号秩化验

由此可知4 来自近乎快困难重重的CD4+ treg巨噬细胞依靠畸变CD4+T巨噬细胞的战斗能力降低。SP四组用蓝色的本站和红色暗示，HD四组用金色的本站和红色暗示，绿色的本站/红色暗示小分子sp606。可用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞完成分选。CD4+CD25−(应答者)被标明为CFSE, Treg按通过观察的比重指示剂。用抗CD3 /28微珠增殖巨噬细胞，培育3天内完成流式巨噬细胞忍术扫描。(a-d)与CD4+应答者相比应的treg培育(自基底)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应答者培育。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE抑止多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止多于。可用HIV依此(激活的响应巨噬细胞不含treg)计算抑止多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 畸变CD4+T巨噬细胞对近乎快困难重重的T巨噬细胞增殖的抑止日益极端。SP四组用蓝色的本站和红色暗示，HD四组用金色的本站和红色暗示，绿色的本站/红色暗示小分子sp606。可用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T巨噬细胞完成分选。CD4+CD25−(应答者)被cfsel标明，treg按通过观察的比重指示剂。用抗CD3 /28微珠增殖巨噬细胞，培育3天内完成流式巨噬细胞忍术(CD25反染)和巨噬细胞因子研究。HD Treg与HD、SP或sp606应答者共同培育。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE抑止百份(b)。(c,d) CD25抑止百份(c)和CD134抑止百份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在培育出来中都的强调。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

假设：我们得不止假设的假设是，来自近乎快困难重重子的增殖心灵CD4+Treg在GITR强调中都受益了扩展和丰富，强调了实质性研究成果Treg在1标准型肝炎风险幼基底中都的异质性的更实质性。

原文不止处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28